細胞培養支原體污染是一種常見(jiàn)的問(wèn)題,它會(huì )導致細胞生長(cháng)和增殖受到抑制,從而影響實(shí)驗結果。以下是可能出現的問(wèn)題:
細胞生長(cháng)緩慢或停滯不前:支原體會(huì )占據細胞內的營(yíng)養源并抑制其他微生物的生長(cháng),從而導致細胞缺乏足夠的營(yíng)養供應,生長(cháng)速度變慢或停滯不前。
細胞形態(tài)異常:支原體感染會(huì )導致細胞形態(tài)發(fā)生改變,如細胞變得不規則、腫脹、變形等。
細胞凋亡增加:支原體感染會(huì )釋放一些有害物質(zhì),這些物質(zhì)會(huì )干擾細胞的正常功能,導致細胞凋亡增加。
細胞代謝異常:支原體感染會(huì )影響細胞的代謝過(guò)程,導致代謝產(chǎn)物積累和能量消耗增加,從而影響實(shí)驗結果。
細胞產(chǎn)生異常蛋白質(zhì):支原體感染會(huì )導致細胞內蛋白質(zhì)合成受到影響,從而產(chǎn)生異常蛋白質(zhì),這可能會(huì )影響到實(shí)驗結果。
細胞產(chǎn)生抗生素耐藥性:支原體感染會(huì )使細胞產(chǎn)生抗生素耐藥性,這意味著(zhù)在后續實(shí)驗中需要使用更高劑量的抗生素才能達到相同的效果。
實(shí)驗結果不可信:由于支原體污染會(huì )影響實(shí)驗結果的準確性和可靠性,因此如果實(shí)驗結果受到了支原體污染的影響,那么這些結果就不具備科學(xué)價(jià)值。
傳染風(fēng)險:如果細胞培養液被支原體污染,那么這些污染物可能會(huì )傳播到其他實(shí)驗室設備或人員身上,從而增加傳染風(fēng)險。
支原體是一種常見(jiàn)的細胞內寄生菌,它會(huì )對細胞的生長(cháng)和增殖產(chǎn)生負面影響。如果您的細胞培養支原體污染了,可以采用以下方法清除支原體:
對于非重要的細胞,如培養中的細胞、WCB的細胞等,將培養物與用過(guò)的培養基滅活后丟棄即可。
對于較為重要的細胞,如來(lái)源珍貴或實(shí)驗室中細胞保藏量較小等可以采用以下(2)-(8)的方法:
用清洗純化法清除支原體污染的方法:細胞營(yíng)養馴化→優(yōu)質(zhì)細胞群的篩選→細胞清洗→反復離心洗滌,其原理是利用離心力、細胞、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達到清除支原體的目的。
用抗生素清除支原體污染的方法:根據抗生素敏感譜選擇合適的抗生素,加入含有抗生素的培養基中,使抗生素濃度達到抑制或殺死支原體的水平。
用抗代謝產(chǎn)物清除支原體污染的方法:加入含有抗代謝產(chǎn)物的培養基中,使抗代謝產(chǎn)物濃度達到抑制或殺死支原體的水平。
用基因工程技術(shù)清除支原體污染的方法:通過(guò)基因工程技術(shù)構建具有抗支原體活性的工程菌株,并將其導入到宿主細胞中。
用物理方法清除支原體污染的方法:如超濾、反滲透、離子交換等。